黃曲霉毒素B1檢測卡

廣州健侖生物科技有限公司

【原理及用途】

本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于檢測谷物、飼料等樣本中的黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）。樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后，樣本溶液中的黃曲霉毒素B1與金標(biāo)抗體相結(jié)合，從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的黃曲霉毒素B1含量大于檢測限時檢測線不顯色，結(jié)果為陽性；當(dāng)樣本溶液中黃曲霉毒素B1含量小于檢測限時檢測線顯紫紅色，結(jié)果為陰性。

【技術(shù)指南】

1、試劑卡靈敏度：2ppb（ng/ml）

    對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。

2、樣本檢測下限：

谷物、飼料、糧油……………10ppb

谷物、飼料（須吹干）………5ppb

【儲存及有效期】

 儲存于陰涼干燥處（2-30℃），有效期24個月。

【需要設(shè)備及耗材】

1、儀器：均質(zhì)器 、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）

2、微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl

3、試劑：甲醇，正己烷

【樣本準(zhǔn)備】

1、樣本處理前須知：

實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結(jié)果。

2、配液：

配液1：樣本提取液

    70%甲醇，即V甲醇:V去離子水=7:3。

3、樣本前處理步驟：

3.1 谷物、飼料

1）稱取2g粉碎樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液

振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。

2）取0.1ml上清，加入0.4ml去離子水，混勻備用。

3.2谷物、飼料（須吹干）

 若要求檢測下限為5ppb時，可按如下操作：

1）稱取2g粉碎樣本于離心管中，加入4ml樣本提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘；

2）取1ml上層液體在50-60℃條件下用氮氣或空氣吹干；

3）先加入0.25ml 70%甲醇溶解剩下的殘留物，劇烈震蕩2分鐘；再加入1ml去離子水，混勻備用。（注意：這一步甲醇與水的加液順序不能顛倒）

         稀釋倍數(shù)：2.5倍     檢測下限：5ppb

3.3糧油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）

1）稱取2g樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液

然后加入8ml正己烷，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。

2）去除上層液體，取0.1ml下層液體加入0.4ml去離子水，混勻備用。

【實驗步驟】

1、 撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。

2 、用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體，緩慢、逐滴的（應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生）滴加4-5滴（約150ul）到加樣孔（S）內(nèi)。

3 、室溫下放置5-8分鐘判斷結(jié)果，超過30分鐘的結(jié)果無效。

【結(jié)果判斷】

1.陰性：在觀察孔內(nèi)，只有對照線區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色線。

2.陽性：在觀察孔內(nèi)，檢測線區(qū)（T）及對照線區(qū)（C）同時出現(xiàn)紫紅色線。抗體滴度越高，檢測線（T）顏色越深。

3.失效：在觀察孔內(nèi)，對照線區(qū)（C）不出現(xiàn)紫紅色線。

(注: 去離子水、自來水、生理鹽水不能作為陰性對照。)

【注意事項】

1、過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。

2、檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開，打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。

3、不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。

4、取液滴管不可混用，以免交叉污染。

5、待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒，否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象，從而影響實驗結(jié)果的判定。

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