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      質(zhì)粒中提試劑盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

      發(fā)布時(shí)間:2014-2-22 12:35:08??????瀏覽次數(shù):

      純化至多100 μg轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒或柯斯質(zhì)粒DNA

      1.純化得到相當(dāng)于2次CsCl梯度離心得到的DNA純度

      2.高產(chǎn)量質(zhì)粒DNA

      3.經(jīng)濟(jì)的制備方法

      4.使用LyseBlue,獲得最佳的裂解效果和最大的DNA產(chǎn)量

      QIAGEN Plasmid Kits通過(guò)重力流陰離子交換柱純化轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多100 μg質(zhì)粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。

      詳細(xì)信息:

      性能

      QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100陰離子交換柱高效純化質(zhì)粒DNA。只需25–100 ml培養(yǎng)基,即可純化獲得多達(dá)100 μg的高拷貝質(zhì)粒DNA。(培養(yǎng)容量取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。)QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:轉(zhuǎn)染、克隆、測(cè)序和體外轉(zhuǎn)錄。


      原理

      QIAGEN-tips內(nèi)獨(dú)特的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計(jì)。它獨(dú)特的分離特性,使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì),減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。

      操作流程

      使用QIAGEN Plasmid Kits,細(xì)菌裂解物通過(guò)離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱,質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,通過(guò)離心收集。

      應(yīng)用

      QIAGEN Plasmid Kits純化得到的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:

      1.轉(zhuǎn)染

      2.克隆

      3.PCR

      4.體外轉(zhuǎn)錄

      技術(shù)參數(shù):

      特點(diǎn)

      參數(shù)

      Applications

      Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.

      Culture volume/starting material

      25–100 ml culture volume

      Plasmid type

      High-copy, low-copy, cosmid DNA

      Processing

      Manual (centrifugation)

      Samples per run; throughput

      1 sample per run

      Technology

      Anion-exchange technology

      Time per run or prep per run

      150 min

      Yield

      <100 μg


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