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      從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

      發(fā)布時間:2014-2-22 12:29:33??????瀏覽次數(shù):

      從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

      產(chǎn)品在線:http://www.sdwandefu.com/Product/8051642613.html

      1.?dāng)?shù)分鐘內(nèi)快速純化得到高品質(zhì)總RNA

      2.即用型RNA在各種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好

      3.少量起始樣本,RNA產(chǎn)量穩(wěn)定

      4.無需酚/ 氯仿抽提,無需氯化銫梯度離心,無氯化鋰或者乙醇沉淀步驟

      RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA,硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本,使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動核酸純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化自動化。處理更小或更大的樣本,可使用RNeasy Micro Kit(離心柱結(jié)合能力為45 μg RNA)、RNeasy Midi Kit(離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA)。

      詳細(xì)信息:

      性能

      RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動物或人類組織樣本,或從100–1 x 107個動物或人類細(xì)胞樣本或酵母中純化總RNA。

      RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產(chǎn)量

      樣本來源

      起始材料

      平均產(chǎn)量(μg

      動物細(xì)胞
      LMH
      HeLa
      COS-7
      淋巴細(xì)胞(未受激)


      1 x 106
      1 x 106
      1 x 106
      1 x 106


      12
      15
      35
      0.5

      小鼠組織



      10 mg
      10 mg
      10 mg


      40
      10
      35

      真菌細(xì)胞
      S. cerevisiae


      1 x 107


      25


      原理

      RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術(shù)整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴(yán)謹(jǐn)性和硅膠膜純化的速度和純度,簡化了總RNA純化技術(shù)。純化得到高品質(zhì)的RNA,并且DNA殘留水平達(dá)到最低。

      操作流程

      RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個動物或人類細(xì)胞中、0.5–30 mg動物或人類組織中或小于5 x 107個酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜。RNA結(jié)合到膜上(最多可結(jié)合100 μg),污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用,可在RNeasy操作過程中進(jìn)行柱上DNA酶處理,去除DNA殘留。之后可在30–100 μl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。


      應(yīng)用

      使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1(10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中),適用于多種下游應(yīng)用,包括:

      1.Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡

      2.終點(diǎn)式RT-PCR

      3.定量real-time RT-PCR

      4.芯片分析

      5.Poly A+ RNA篩選

      技術(shù)參數(shù):

      特點(diǎn)

      參數(shù)

      Applications

      PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray

      Elution volume

      30–100 μl

      Format

      Spin column

      Main sample type

      Tissue, cells

      Processing

      Manual (centrifugation)

      Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

      Total RNA

      Sample amount

      0.5–30 mg

      Technology

      Silica technology

      Time per run or per prep

      20 minutes

      Yield

      Varies


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